mybiofield: 您好,我現在準備用ELISA法夾心法測人血清中ELISA試劑盒IL-1,IL-6,CRP,TNF,但是對具體操作上海ELISA試劑盒還有些很低級的問題,請問:    
1.預實驗時,標準品的濃度怎樣確定?梯度做幾個,需要做空白孔嗎?豬ELISA試劑盒復孔要做嗎?
2.樣本的梯度作白介素ELISA試劑盒幾個?稀釋倍數確定的依據時什么ELISA試劑盒價格?
3.我測的樣本中TNF量很低,禽ELISA試劑盒國外有人用高敏試劑盒,國內有用化學發光法,您知道有沒有更經濟的方法?
生e網，多謝!
請問mybiofield：
雙抗夾心法中，zui后TMB用硫酸終止，測量OD450的時候是用單波長450nm還是雙波長測量？如果是后者，參考波長是哪個？630nm可以嗎？
我陰性陽性血清都是從1：50開始被比稀釋，到1：25600，陽性OD值都在1.0以上，1.7以下。陰性值在0.3以下。0.2的不多，多數在0.1及其以下。我的血清效價這么高，但是怎么OD值到不了別人說的2或者3呢？
mybiofield：
謝謝你的幫助
我是用間接ELISA檢測人補體C1q 抗體，還想請教mybiofield
我的預實驗是這樣的
1、用pH9.6,0.05M的碳酸鹽稀釋抗原C1q,10ug/mL,5ug/mL,2.5ug/mL
100uL/孔，4度過夜，PBST洗板三次
2、用10%的小牛血清（pH7.2的PBS），200uL/孔，37度3h,PBST洗板三次
3、加入陰陽性血清100uL/孔，37度，2h，PBST洗板五次
4、 PBST（含1%的小牛血清）稀釋酶標記的羊抗人IgG1:10000,1:20000, 1:40000,100uL/孔 ,37度，半小時
結果：   10ug/mL  5ug/mL  2.5ug/mL
1:10000 +   0.983  0.740  0.714
1:10000 -   0.577  0.676  0.576
1:10000空白 0.180  0.134  0.097
1:20000 +   0.508  0.506  0.367
1:20000 -   0.333  0.385  0.313
1:20000空白 0.085  0.094  0.078
1:40000 +   0.331  0.379  0.229
1:40000 -   0.233  0.303  0.261
1:40000空白0.061  0.068  0.06
請mybiofield幫忙分析，謝謝。用Elisa試劑盒的時候我該怎么選擇包被濃度，酶的濃度以及封閉的條件如何，多謝
mybiofield :你好
我們現在的實驗是從肝組織勻漿中檢測TNF-a,但好幾次預試的結果,TNF-a的含量都超過了Elisa試劑盒的上限,我們的Elisa試劑盒是從晶美買的,肝勻漿的濃度從 1:10 1:20 1:40 到1:100 1:200都沒有很大的區別,勻漿用的是PBS,勻漿方法用的是先用勻漿器研碎,再在-86度冰箱反復凍融3次,其余均嚴格按Elisa試劑盒內說明操作,請問這可能是哪一步出了問題?或是肝勻漿本身上海ELISA試劑盒也會導致假陽性結果?如何才能解決?ELISA試劑盒價格謝謝了,在線等!
mybiofield :你好
能不能說一點點關于Elisa試劑盒保護液的配方豬ELISA試劑盒。
gsljz wrote:
請問樓主：禽ELISA試劑盒我想自己做某個抗原成份的elisa試劑，ELISA試劑盒即自己包被酶標板，沒有抗原做標準品怎么辦？白介素ELISA試劑盒是否需要去買？