B16細(xì)胞|STR入庫

產(chǎn)品名稱：B16細(xì)胞

是否STR：是

供應(yīng)公司：慧穎生物

復(fù)蘇周期：1-2周

您是否在關(guān)心各種細(xì)胞系特異性鑒定方法，是否被細(xì)菌，病毒，支原體污染，購買慧穎生物細(xì)胞株細(xì)胞系值得放心，大部分細(xì)胞經(jīng)過STR鑒定，支原體，細(xì)菌，病毒檢測(cè)后入庫。！

分離培養(yǎng)法

分離培養(yǎng)法是支原體檢測(cè)的金標(biāo)方法，其檢測(cè)精確度zui高。這種方法是從可疑的細(xì)胞培養(yǎng)體系中取樣，并接種到zui適宜支原體生長(zhǎng)的瓊脂平板上。如果樣本中含有支原體，它們就會(huì)在這種瓊脂平板上*生長(zhǎng)，zui終形成明顯可見的特征性菌落。分離培養(yǎng)法基本不會(huì)出現(xiàn)假陰性結(jié)果，因此被譽(yù)為支原體檢測(cè)金標(biāo)準(zhǔn)。不過分離培養(yǎng)法也存在兩個(gè)弊端，一是檢測(cè)時(shí)間太長(zhǎng)，支原體要長(zhǎng)出明顯克隆至少需要4周時(shí)間。二是盡管可以檢測(cè)絕大多數(shù)支原體種類，分離培養(yǎng)法也有力所不及的時(shí)候，例如支原體M. hyorhinis。

DNA檢測(cè)

DNA檢測(cè)需要將可疑樣品與指示細(xì)胞共同培養(yǎng)，因此一般需要幾天時(shí)間。DNA檢測(cè)所用的指示細(xì)胞通常是細(xì)胞質(zhì)區(qū)域較大的Vero細(xì)胞，如果原樣本中含有支原體，那么當(dāng)細(xì)胞DNA被熒光染料（如Hoechst染料）染色時(shí)，就可以在指示細(xì)胞的核周圍觀察到熒光斑點(diǎn)或熒光顆粒。分離培養(yǎng)法用來檢測(cè)支原體M. hyorhinis菌株并不可靠，而DNA法可以準(zhǔn)確的將其檢測(cè)出來。

PCR法

PCR法也可以檢測(cè)M. hyorhinis菌株，PCR法檢測(cè)支原體只需幾個(gè)小時(shí)，是zui快但也是zui不靈敏的支原體檢測(cè)方法。該方法采用針對(duì)支原體DNA的引物用PCR檢測(cè)可疑樣本，其中PCR引物通常針對(duì)支原體的16S rRNA基因。在凝膠電泳過程中，支原體DNA會(huì)顯示為特異性條帶，以此指示支原體的存在。PCR法可以檢測(cè)大多數(shù)支原體，但謹(jǐn)慎起見同時(shí)使用另一種檢測(cè)方法來進(jìn)行驗(yàn)證。

酶學(xué)檢測(cè)和ELISA

此外，也還存在一些其他支原體檢測(cè)方法。例如酶學(xué)檢測(cè)是將可疑樣本添加到特定底物中，在這一體系內(nèi)支原體的酶可以將ADP轉(zhuǎn)化為ATP，隨后能利用ATP發(fā)光的luciferase酶就可以指示支原體的存在。ELISA也能用于支原體檢測(cè)，以ELISA法為基礎(chǔ)的支原體檢測(cè)一般使用針對(duì)支原體16S rRNA基因的帶標(biāo)記探針或抗體，來檢測(cè)培養(yǎng)物中是否含有支原體。

定期檢測(cè)

支原體感染會(huì)使培養(yǎng)細(xì)胞慢慢枯萎，因此對(duì)培養(yǎng)細(xì)胞定期進(jìn)行支原體檢測(cè)非常重要。一般來說每1至3個(gè)月就應(yīng)該進(jìn)行一次支原體檢測(cè)。將定期支原體檢測(cè)常規(guī)化堅(jiān)持下去，是細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室應(yīng)對(duì)支原體感染的關(guān)鍵。

B16細(xì)胞|STR入庫

出庫公司 細(xì)胞代號(hào) 細(xì)胞名稱 備注

慧穎生物 siha 人宮頸癌細(xì)胞 STR

慧穎生物 MCF-7 人乳腺癌細(xì)胞 STR

慧穎生物 Hela 人宮頸癌細(xì)胞 STR

慧穎生物 HCT116 人的結(jié)腸癌細(xì)胞 STR

慧穎生物 Hep G2 人肝癌細(xì)胞 STR

慧穎生物 NCI-H1437 人肺癌細(xì)胞 STR

慧穎生物 DU 145 人前列腺癌細(xì)胞 STR

慧穎生物 HT1080 人纖維肉瘤細(xì)胞 STR

慧穎生物 T24 人膀胱移行細(xì)胞癌細(xì)胞 STR

慧穎生物 T47D 人乳腺管癌細(xì)胞 STR

慧穎生物 5637 人膀胱癌細(xì)胞 STR

慧穎生物 U251 人膠質(zhì)瘤細(xì)胞 STR

慧穎生物 PANC-1 人胰腺癌細(xì)胞 STR

預(yù)防支原體污染的建議：

  培養(yǎng)工作中，主要從以下幾個(gè)方面來預(yù)防支原體的污染：

控制環(huán)境污染;

嚴(yán)格實(shí)驗(yàn)操作;

細(xì)胞培養(yǎng)基和器材要保證無菌;

在細(xì)胞培養(yǎng)基中加入適量的抗生素。

支原體污染細(xì)胞后，特別是重要的細(xì)胞株，有必要清除支原體，常用方法有抗生素處理、抗血清處理、抗生素加抗血清和補(bǔ)體聯(lián)合處理。支原體zui突出的結(jié)構(gòu)特征是沒有細(xì)胞壁，一般來講，對(duì)作用于細(xì)胞壁生物合成的抗生素，如 -內(nèi)酰胺類、萬古霉素等*不敏感;對(duì)多粘菌素(polymycin)、利福平、磺胺藥物普遍耐藥。對(duì)支原體zui有抑制活性及常用于支原體感染治療的抗生素是四環(huán)素類、大環(huán)內(nèi)酯類及一些氟喹諾酮;其他類抗生素如氨基糖苷類、氯霉素對(duì)支原體有較小抑制作用，所以常不用來作為支原體感染的化學(xué)治療劑。

支原體污染在細(xì)胞培養(yǎng)中實(shí)際上是比較常見的, 據(jù)資料, 可達(dá)30%甚至更高. 支原體污染時(shí)細(xì)胞表現(xiàn)為長(zhǎng)得不好,也不死亡, 同時(shí), 培養(yǎng)基又是清亮的. 時(shí)間長(zhǎng)達(dá)一周也沒有什么變化. 這時(shí)基本上可以判斷出是支原體污染了, 愿意檢測(cè)就檢測(cè)一下,不愿意直接用清除試劑處理吧.

避免細(xì)胞污染，可以從預(yù)防著手，超凈工作臺(tái)物品放置要合理、進(jìn)入細(xì)胞房要換鞋和穿實(shí)驗(yàn)服、實(shí)驗(yàn)員戴手套后要用酒精等消毒、避免細(xì)胞交叉污染等等。